高速離心機(jī)的幾種分離技術(shù)方法的你都了解嗎？

　　A.差速離心：逐次增加離心力，每次可沉降樣品溶液中的一些組份。

　　差速離心是一種較常用的方法。在這種方法中，離心管在開始時(shí)裝滿了均一的樣品溶液。通過在一定速度下一定時(shí)間的離心后，就可得到兩個(gè)部份：沉淀和上清液。

　　通常在離心時(shí)把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時(shí)所需的組份大部分仍留在上清液中。然后將收集到的上清液以更高速度離心，把所需的粒子沉積下來。離心的時(shí)間要選擇得當(dāng)，使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對(duì)于得到的沉淀和上清液可以進(jìn)行進(jìn)一步的離心，直到達(dá)到所需要的分離純度為止。差速離心的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，但分離純度不高。

　　B.密度梯度離心法：可以同時(shí)使樣品中幾個(gè)或全部組份分離，具有很好的分辨率。

　　1)速率區(qū)帶法：

　　根據(jù)樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步驟如下：

　　在離心管中裝入密度梯度溶液，溶液的密度從離心管頂部底部逐漸增加(正梯度)。

　　將所需分離的樣品小心地加密度梯度溶液的頂部。高速離心機(jī)屬常規(guī)實(shí)驗(yàn)室用離心機(jī)，廣泛用于生物，化學(xué)，醫(yī)藥等科研教育和生產(chǎn)部門 ，它利用轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力，分離液體與固體顆粒或液體混合物中各組分，適用于微量樣品快速分離合成。樣品在梯度溶液表面形成一負(fù)梯度。

　　由于不同大小的粒子在離心力作用下，在梯度中移動(dòng)的速度不一樣，所以經(jīng)過離心后會(huì)形成幾條分開的樣品區(qū)帶。冷凍離心機(jī)就是利用離心力使得需要分離的不同物料得到加速分離的機(jī)器。冷凍離心機(jī)有分為低速、高速冷凍離心機(jī)，以及超速分析、制備兩用冷凍離心機(jī)等多種型號(hào)。

　　注意：樣品粒子的密度大于梯度液注中任一點(diǎn)的密度。離心過程在區(qū)帶到達(dá)管子底部前停止。

　　2)等密度（單位:g/cm3或kg/m3)離心法：

　　根據(jù)粒子的不同密度來分離。離心過程中，粒子會(huì)移與它本身密度相同的地方形成區(qū)帶。

　　密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中。經(jīng)離心后，樣品粒子達(dá)到它們的平衡點(diǎn)。

　　注意：平衡后粒子的分離由其密度決定，與時(shí)間無關(guān)，此時(shí)再改變離心轉(zhuǎn)速，只能改變區(qū)帶的相對(duì)位置。

　　2.密度梯度分析法

　　梯度介質(zhì)性質(zhì)與選擇：

　　應(yīng)具備的性質(zhì) ：

　　梯度物質(zhì)的選擇原則是滿足分離方法的基本要求，一個(gè)理想的密度材料標(biāo)準(zhǔn)它應(yīng)是：

　　所形成的溶液密度應(yīng)包括所需要的密度范圍。

　　具有某些性質(zhì)，如折射率，據(jù)此可測(cè)定它的濃度。

　　所形成的溶液粘度低。

　　不損傷所分離的樣品。

　　離心分離后容易除去。

　　不妨礙分離積分的分析。